Значение-слова
значение слова иммуноблоттинг
Иммуноблоттинг (или иммуноблоттинг, иногда его называют вестерн-блоттинг) — это лабораторный метод, используемый для выявления и анализа белков в образцах. Метод основан на использовании антител для обнаружения специфических белков, которые были разделены и перенесены на мембрану. Вот как это работает:
- Электрофорез: Белки из образца (например, из клеточных лизатов или тканей) разделяются по размеру и заряду с помощью гель-электрофореза.
- Перенос: После разделения белков в геле их переносят на специальную мембрану (чаще всего на нитроцеллюлозную или ПВФ-мембрану). Этот процесс называется переносом или блоттингом.
- Блокировка: Мембрана обрабатывается веществом, которое блокирует все неспецифические связывания, чтобы предотвратить фоновое окрашивание.
- Инкубация с антителами: Мембрана инкубируется с первичным антителом, которое специфично связывается с целевым белком. Затем мембрана обрабатывается вторичным антителом, которое связано с ферментом или другим детектором и распознает первичное антитело.
- Обнаружение: При добавлении соответствующего субстрата вторичное антитело, связывающееся с ферментом, проявляет сигнал, например, флуоресценцию или цвет, который можно визуализировать и измерить.
Иммуноблоттинг используется для изучения экспрессии белков, их модификаций, а также для подтверждения наличия специфических белков в образцах. Метод широко применяется в биомедицинских исследованиях и клинической диагностике.